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Willem Witsen wurde für seine Gemälde, Aquarelle und Radierungen von Stadtansichten bekannt. Er beherrschte die Radiertechnik so perfekt, dass Künstlerkollegen (darunter Marius Bauer) seinen Rat suchten. Witsen war bestrebt, das Wesen der Stadt einzufangen. In jungen Jahren faszinierten ihn besonders die großen Formen von Regen, Schnee, Dampf und Nebel. Um seinen Motiven so nah wie möglich zu kommen, arbeitete er sogar von einem Ruderboot aus. Von 1911 bis Anfang 1914 ließ er ein Lastkahn in Amsterdam zu einem Atelier umbauen. Neben Stadtansichten wählte Witsen häufig Landschaften als Sujet, während gegen Ende seines Lebens Blumenstillleben und Porträts zu seiner Spezialität wurden.
Willem Witsen, das sechste und letzte Kind einer wohlhabenden Familie, deren Stammbaum sich bis zu einer berühmten Amsterdamer Regentenfamilie zurückverfolgen lässt, wuchs in der Hauptstadt auf. Sein Vater betrieb ein Eisenwarengeschäft; seine Mutter starb, als Willem noch zur Schule ging. Von 1876 bis 1884 studierte Witsen an der Staatlichen Akademie der Schönen Künste Amsterdam. Dort freundete er sich mit Malern an, die die niederländische Kunstszene der 1890er-Jahre maßgeblich prägen sollten: Antoon Derkinderen, Willem Tholen, Jacobus van Looy, Jan Veth, Eduard Karsen und Jan Toorop. Später lernte er George Breitner und Isaac Israels kennen, die an der Königlichen Akademie in Den Haag studiert hatten. 1880 gründete Witsen mit seinen Kommilitonen die Künstlervereinigung Sint Lucas. Drei Jahre später wurde er Mitglied der Flanor Literary Society. Dort lernte er Willem Kloos, Albert Verwey und Frederik van Eeden kennen, die 1885 die Gründer von De Nieuwe Gids gründeten. In den Anfangsjahren dieser Zeitschrift verfasste Witsen unter einem Pseudonym einige Kunstkritiken.
Während seines Studiums arbeitete Witsen regelmäßig auf „Ewijkshoeve“, dem Landhaus seines Vaters in der Nähe von Lage Vuursche, und besuchte im Winter 1881/82 Kurse an der Königlichen Akademie der Schönen Künste in Antwerpen. Ab 1888 lebte Witsen mehrere Jahre in London, eine fruchtbare Zeit. Hier entdeckte er auch seine Leidenschaft für die Fotografie; ihr verdanken wir viele schöne Porträts seiner Familie und Freunde. Anfang 1891 kehrte Witsen nach Amsterdam zurück und übernahm Breitners Atelier im ersten Stock des Hauses Oosterpark 82; sein Nachbar im Erdgeschoss war Isaac Israels. In dieser Zeit knüpfte Witsen Kontakte zum Kunsthandel E.J. van Wisselingh & Co., wo seine Werke fortan zum Verkauf angeboten wurden. Seine erste Einzelausstellung fand dort 1895 statt.
1893 heiratete Witsen Elizabeth (Betsy) van Vloten, eine der Töchter von Johannes van Vloten. Das Paar ließ sich in Ede nieder, wo drei Söhne geboren wurden: Willem (Pam) (1894), Erik (1896) und Odo (1898). Nach der Scheidung kurz nach der Jahrhundertwende kehrte Witsen 1901 nach Amsterdam zurück, wo er nach einigen Umherziehen 1906 wieder in sein altes Atelier im Oosterpark zog. Ein Jahr später heiratete er erneut, und zwar die Brauertochter Marie Schorr (1875–1943).
In Wijk bij Duurstede suchte Witsen nach neuen Motiven und schuf dort großformatige Radierungen des Müllers und des Schmieds. Später, in den Jahren 1914 und 1915, bereiste er Deutschland, Italien, die Schweiz, die Vereinigten Staaten und Kanada und schließlich 1920/21 Niederländisch-Indien. Witsen starb am 13. April 1923 im OLVG-Krankenhaus in Amsterdam.